شناسایی عامل عارضه خشکیدگی شاخه و زوال درختان میوه هسته دار (برگ نقره ای) در شرق مازندران
عنوان دوره: بیست و دومین کنگره گیاهپزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
خشکیدگی شاخه و زوال درختان میوه هسته دار ( هلو و شلیل) یکی از مهمترین عوامل بازدارنده تولید محصول در استان مازندران طی سال های اخیر بوده است. این عارضه موجب خشکیدگی سرشاخه ها شده و به تدریج در شاخه های اصلی گسترش می یابد. بافت های زیر پوست تنه قهوه ای، برگها نقره ای رنگ گردیده ریزش می نمایند. به طور کلی در این بیماری درخت دچار زوال تدریجی شده و در طی دو تا سه سال از بین می رود. در طی تابستان سال های1392 و 1393 از باغ های درختان میوه هسته دار قسمت های شرقی استان مازندران بازدید به عمل آمد و از درختان شلیل رقم اسپرینگ کرستspring crest) ) و هلوی رقم سان گلدsun gold) ) واجد علائم برگ نقره ای و سر خشکیدگی نمونه برداری انجام و پس از شستشو و ضد عفونی سطحی، با محلول 0.5 درصد هیپوکلریت سدیم ضدعفونی شده و در محیط غذایی سیب زمینی-دکستروز-آگار(PDA) کشت شدند. جدایه های قارچی به دست آمده، خالص سازی و بر اساس خصوصیات مورفولوژیک، قارچ Trametes versicolor شناسایی شدند. آزمون بیماریزایی بر روی ده نهال گلدانی دو ساله از هر یک از ارقام شلیل اسپرینگ کرست(spring crest) و هلوی سان گلد(sun gold) در گلخانه انجام شد . بدین ترتیب که در بیست سانتی متری از سطح پوست تنه اصلی، خراشی به طول سه تا چهار میلی متر با تیغ سترون ایحاد و بلوک های 4 میلی متری ازحاشیه پرگنه سه روزه هر یک از جدایه های قارچی روی محیط کشت PDA در این محل قرار داده شد و روی آن با پنبه مرطوب سترون پوشانده و با پارافیلم بسته شد. شد. سه نهال از هر رقم نیز با بلوکی از محیط کشت استریل به همین روش مایه کوبی شد. نهال ها در گلخانه ( دمای 25 تا سی درجه سانتی گراد و رطوبت نسبی 65 تا 70 درصد) نگهداری و پس از بیست روز بررسی و نمونه برداری و کشت بافت تلقیح شده هر یک از نهال ها صورت گرفت. خالص سازی ژنوم جدایه های مورد نظر انجام شد و جهت ردیابی عوامل بیماریزای جداسازی شده، تکثیر با آغازگر‌های ITS1 ، ITS4 و LAC صورت گرفت. محصول نهایی PCR پس از تعیین توالی و همردیف سازی، با توالی های موجود در بانک ژن Gen Bank (NCBI) توسط نرم افزار BLAST مقایسه و شباهت جدایه های مورد نظر با قارچ Trametes versicolor در سطح95 درصد مشخص گردید. در سال های گذشته این عارضه بر اساس علائم ظاهری به عوامل بیماری زای فیتوپلاسمایی یا ویروسی نسبت داده شده بود.
کلیدواژه ها