اولین گزارش از وقوع لکه‌برگی باکتریایی گوجه فرنگی ناشی از Xanthomonas perforans در ایران
عنوان دوره: بیست و دومین کنگره گیاهپزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
در بهار 1394، علائم لکه‌برگی و بافت مردگی در برگهای گیاهان گوجه فرنگی (رقم سانسید 6189) شهرستان کازرون در استان فارس مشاهده گردید. لکه‌های تیره و منفرد در روی میوه‌های نارس و رسیده و کاسبرگهای گیاهان آلوده نیز مشاهده می‌شد. از گیاهان دارای علائم نمونه برداری شده و نمونه ها جهت جداسازی و شناسایی عامل بیماری به آزمایشگاه منتقل شدند. بافتهای آلوده پس از ضدعفونی سطحی توسط هیپوکلرید سدیم 5/0 درصد، سه بار توسط آب مقطر استریل شسته شدند. قطعاتی از بافتها در مقداری آب مقطر استریل خرد شده و از سوسپانسیون حاصل بر روی محیط کشت YPGA کشت داده شد. پس از 4-3 روز نگهداری در دمای 27-25 درجه سلسیوس، پرگنه های زرد رنگ، برجسته و شفاف بر روی محیط کشت ظاهر شدند. آزمونهای بیوشیمیایی معمول در باکتری شناسی آنجام شد و نتایج نشان داد جدایه های به دست آمده گرم منفی، زرد رنگ، لوان مثبت، اکسیداز منفی و کاتالاز مثبت و در روی محیط کشت YDC دارای پرگنه های زرد لعابی بودند. بر اساس آزمونهای بیوشیمیایی جدایه ها Xanthomonas sp. شناسایی شدند و این شناسایی با استفاده از آغازگرهای اختصاصی جنس زانتوموناس (X-ITS-F3j ، X-ITS-F3k ، X-ITS-F3c ، X-ITS-F3d و X-ITS-R2) و تکثیر قطعه 254 نوکلئوتیدی در همه جدایه ها تائید گردید. جدایه های استاندارد گونه های زانتوموناس بیماریزا در روی گوجه فرنگی شامل X. euvesicatoria (ICMP 109) و(ICMP 63) X. vesicatoria و(ICMP 16689) X. gardneri و(ICMP 16690) X. perforans به عنوان کنترل مثبت در تمامی آزمونها استفاده گردید. برای شناسایی دقیق جدایه ها از آغازگرهای Bs-XeF/Bs-XeR برای گونه X. euvesicatoria ، Bs-XvF/Bs-XvR گونه X. vesicatoria ، Bs-XgF/Bs-XgR گونه X. gardneri و Bs-XpF/Bs-XpR گونه X. perforans استفاده شد ولی هیچ کدام از آغازگرهای فوق هیچ قطعه ای را در جدایه ها تکثیر نکردند. از طرفی تمامی آغازگرها قطعه مورد انتظار را در جدایه های استاندارد تکثیر کردند. مطالعه فایلوژنتیک جدایه ها با استفاده از تعیین توالی ژنهای gyrB و hrpB نشان داد جدایه های گوجه فرنگی متعلق به گونه X. perforans می باشند. آزمون بیماریزایی جدایه ها بر روی گیاهان گوجه فرنگی، فلفل دلمه ای ، فلفل تند و بادنجان در شرایط گلخانه انجام شد و نتایج این آزمون نشان داد جدایه ها فقط بر روی گیاه گوجه فرنگی بیماریزا می باشند. بعد از گذشت 15 روز از مایه زنی، علائم لکه برگی و بافت مردگی با حاشیه زرد رنگ در برگهای مایه زنی شده گوجه فرنگی مشاهده گردید. بنابر اطلاعات موجود، این اولین گزارش از وقوع بیماری لکه برگی باکتریایی گوجه فرنگی ناشی از گونه X. perforans در ایران می باشد.
کلیدواژه ها