وقوع سرطان طوقه و ساقه ناشی از Agrobacterium tumefaciens در خزانه تولید نهال مرکبات
عنوان دوره: بیست و دومین کنگره گیاهپزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
تکثیر و کشت ارقام گواهی شده و مطلوب در دو دهه‌ی اخیر در مازندران مورد توجه قرار گرفته و ارقام متعددی از پرتقال از جمله پرتقال (Citrus sinensis) ، نارنگی (C. paradise) و انواع ارقام هیبرید شامل لایم کوآت (C. aurantifolia × Fortunella japonica) ، تانجلو (C. reticulate × C. paradisi) و تانگور (C. reticulate × C. sinensis) که از اروپا وارد و در مازندران و چند استان دیگر کشت و تکثیر داده شدند. در سال ۱۳۹۴ از گلخانه های تولید نهال مرکبات در ساری بازدید صورت گرفت که طی آن مشاهده شد که در محل های پیوند شاخه های تازه رشد پرتقال ناولینا و نارنگی اوکیتسوی دو پایه از هیبرید سیترنج کاریزو (Poncivus trifoliate × C. sinensis) بیش رشدی وجود دارد؛ لذا از آن ها نمونه برداری و نمونه ها به آزمایشگاه منتقل شدند. گال ها به طور کامل در زیر آب شسته شدند و سپس قطعاتی از آن بار دیگر در یک پتری حاوی آب مقطر استریل قرار داده شد که به کمک تیغ خرد و نمونه ها به مدت 30 دقیقه در دمای اتاق نگه‌داری شدند. قطراتی از سوسپانسیون تهیه شده به وسیله‌ی یک لوپ استریل روی چند محیط کشت D1M مخطط شده و تشتک ها در دمای 25 تا 28 درجه سلسیوس نگه‌داری شدند. پس از 2 تا 3 روز تک کلنی های مشابه اگروباکتریوم ( گرد ، محدب با رنگ سبز متالیک ) از روی محیط D1M انتخاب و برای خالص سازی بیشتر روی محیط کشت های D1M و آگار غذایی ( nutrient agar + sucrose, NAS ) مخطط شدند. کلنی ها روی محیط کشت NAS به صورت سفید ، محدب ، گرد و مخاطی بودند. جدایه ها گرم منفی، کاتالاز و اکسیداز مثبت، متحرک و هوازی بودند. جدایه ها قادر به تحمل نمک ٪2 و رشد در دمای °۳۵ درجه سلسیوس بودند. آن ها قادر به هیدرولیز اوره آز و توئین 80 ولی فاقد توانایی در تولید رنگ فلورسنت روی محیط کشت King's B ، احیای نیترات ، تولید اندول ، هیدرولیز ژلاتین و نشاسته بودند. جدایه های نماینده باعث تشکیل کالوس در برش های هویج ( Daucus carota ) و همچنین تشکیل گال های کُند رشد به اندازه‌ی دو میلی متر پس از هشت هفته بر روی پایه های سیترنج سه ماهه بودند. قطعه‌ی bp ۲۲۴ ژن virD برای ردیابی جدایه های گال زای Agrobacterium tumefaciens استفاده می شود که جدایه ها توانایی تکثیر این قطعه با استفاده از جفت آغازگر virD2A/virD2C در PCR بودند.
کلیدواژه ها