بررسی اثر غلظتهای مختلف نانو ذرات نقره بر تشکیل بیوفیلم در سه جدایه از باکتریهای PGPR

عنوان دوره: بیست و یکمین کنگره گیاه پزشکی ایران

جمعیت های متشکل از یک گونه یا گونه های متنوع باکتری به صورت چسبیده به یکدیگر یا به سطوح زنده و غیر زنده در بستری از پلی ساکاریدهای خارج سلولی را بیوفیلم می نامند. در تمام مراحل تشکیل بیوفیلم فاکتورهای ژنتیکی و محیطی دخالت دارند، بدین ترتیب در این تحقیق اثر، نانو ذرات نقره بر تشکیل بیوفیلم مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور جدایه های باکتریایی Psuedomonas fluorescens UTPF5 ، Psuedomonas fluorescens UTPF68 و Bacillus subtilis 3e استفاده شد. آزمون به روش میکروتیترپلیت انجام شد. از کشت 24 ساعته باکتری ها به محیط کشت TSB منتقل و نمونه ها به مدت 24 ساعت در شیکر انکوباتور با دمای 28 درجه سلسیوس و 135 دور در دقیقه نگهداری شدند. سپس به هر یک از چاهکها 80 میکرولیتر محیط کشت TSB، 40 میکرولیتر از غلظتهای 25/0، 5/0، 1، 2، 4 و 8 میکرولیتربرلیتر نانو ذرات نقره و در نهایت 80 میکرولیتر از سوسپانسیون باکتری ها با OD، 5/0 اضافه شدند. میکروپلیت 24 ساعت در دمای 28 درجه سلسیوس نگهداری شد. پس از آن محتویات هر یک از چاهکها با سرم فیزیولوژیک استریل شسته و باکتری های چسبیده به هر چاهک با متانول 99% فیکس و چاهکها با استفاده از کریستالویوله 2/0 رنگآمیزی شدند. در نهایت OD هر چاهک با طول موج 492 نانومتر اندازه گیری شد. غلظت 8 میکرولیتربرلیتر بیشترین تأثیر را در جلوگیری از تشکیل بیوفیلم در این سه جدایه باکتریایی داشته است. در مورد دو باکتری UTPF5 و UTPF68 ، افزایش غلظت از 25/0 تا 2 میکرولیتربرلیتر سبب افزایش تشکیل بیوفیلم شده است. که در تمامی موارد به جز غلظت 25/0 میکرولیتربرلیتر اختلاف معنی داری بین تیمارها و نمونه شاهد در این دو باکتری وجود دارد. در مورد باکتری B. subtilis 3e در غلظت 25/0 میکرولیتربرلیتر بیشترین میزان تشکیل بیوفیلم مشاهده شد که اختلاف معنی داری با شاهد داشت.

نانو ذرات نقره؛ بیوفیلم؛ باکتری